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大鼠血糖酶联免疫分析(ELISA)

作者:上海研辉生物科技有限公司 2011-11-23T00:00 (访问量:2159)

大鼠血糖酶联免疫分析(ELISA

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

药品名称:

通用名:大鼠血糖(blood glucose)酶联免疫分析试剂盒

使用目的:

本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中血糖(blood glucose)含量。

实验原理

本试剂盒应用间接法测定标本中大鼠血糖水平。用纯化的大鼠血糖抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的血糖标准品和未知浓度的血糖待检样品,温育后,加入生物素标记的抗IgG抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血糖呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠血糖浓度。

试剂盒组成

1

20倍浓缩洗涤液

50ml×1

 

 

9

标准品S1480μmol/L

0.5ml×1

2

链霉亲和素-HRP

6ml×1

标准品S2320μmol/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×8

标准品S3160μmol/L

0.5ml×1

4

生物素标记的抗-IgG抗体

6ml×1

标准品S480μmol/L

0.5ml×1

5

显色剂A

6ml×1

标准品S540μmol/L

0.5ml×1 

6

显色剂B

6ml×1/

10

密封袋

1

7

终止液

6ml×1

11

封板膜

3

8

样品稀释液

6ml×1

12

说明书

1

 

标本要求

1不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融

操作步骤

1.       根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

2.       加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl在样本反应孔中先加入待测样品10μl再加入样品稀释液40μl(样品最终稀释度为5倍),盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37温育45分钟。

3.       配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

4.       洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复4次,拍干。

5.       加生物素标记的抗-IgG抗体:每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl

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