产品信息
 
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
 
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Lysis Component
11406ES60
100 T
139.00
11406ES76
500 T
387.00
 
产品描述
 
本试剂采用独特的裂解缓冲液体系，可以快速使细胞裂解，释放出萤光素酶。在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，释放出的萤火虫萤光素酶（Firefly luciferase）能够催化萤光素（luciferin）氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物荧光，该萤光可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示：

图1：萤火虫萤光素酶检测原理图
 
产品组分
 
组分编号
组分名称
产品编号/规格
11406ES60（100 T）
11406ES76（500 T）
11406-A
细胞裂解液
2×30 mL
10×30 mL
 
运输与保存方式
 
干冰运输。-20℃保存，有效期1年。
 
注意事项
 
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！
 
 
实验步骤
 
1.细胞
1）将细胞裂解液充分混匀，按如下方式加入细胞裂解液，充分裂解细胞。
a: 对于贴壁细胞，吸尽细胞培养液，按照下表比例加入细胞裂解液，轻轻旋转培养皿或者培养板使裂解液完全覆盖细胞；
b: 对于悬浮细胞，离心弃去上清，按照下表比例加入裂解液。
细胞培养板
96孔板
48孔板
24孔板
12孔板
6孔板
裂解液加入量
100 μL
150 μL
200 μL
300 μL
μL
2）冰上孵育5 min，充分裂解细胞。
3）用于荧光检测或保存。
【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。
2.叶片组织（以烟草叶片为例，仅供参考）
1）取3-4片直径为6-8 mm的处理好的烟草叶盘，放入2 mL的 EP 管（提前放入3-4个小钢珠）中，液氮中冷冻，使用破碎仪进行研磨破碎（45 Hz，30 s）。破碎完全后在EP管中加入100 μL裂解液。
8）冰上孵育5 min左右，充分裂解叶片。
9）10000-16000 rpm离心1 min，取上清进行荧光检测或保存。
【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。
3.原生质体（仅供参考）
1）将重悬后的原生质体离心收集至2 mL离心管中，加入100 μL左右的裂解液。
2）冰上孵育5 min左右，充分裂解原生质体。
3）用于荧光检测或保存。
【注】：裂解产物可室温保存6 h，4℃保存16 h，-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融）。
 
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产品名称
货号
规格
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