鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
产品名称: 鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称: Acinetobacter lwoffi
产品编号: HZ-15-76700
产品价格: 0
产品产地: 中国/美国/欧洲
品牌商标: HZbscience
更新时间: 2023-08-17T10:24:20
使用范围: null
- 联系人 : 鲍丽雯
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鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒使用支原体污染PCR检测试剂盒,能在2到3小时内获得可靠的结果,是一种灵敏度高、特异性强、快速的检测支原体污染的方法,具有以下特点: ①特异性引物是针对高度保守的支原体16S rRNA序列设计的,可用于检测非常广泛的支原体种类,不受真核细胞或细菌DNA干扰。经本试剂盒测试的支原体菌株涵盖了所有常见的支原体污染种类; ②灵敏度极高,最低仅需10个拷贝的支原体基因组即可使检测呈阳性; ③阳性对照所用引物与支原体检测相同,可帮助判断假阴性现象,避免假阴性导致的误判; ④包含PCR反应所需的所有成分,只需进行一次PCR反应,使用方便。
鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为 6 个月。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 DNA。注意:可以选用本公司的一管式病毒 DNAout 戒柱
式病毒 DNAout 产品。
二、PCR(60 uL 体系)
1、样品管:在 PCR 管中加入下列成分:
鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒成分 加入量
PCR MagicMix 2.0 30 uL
待检测样品 DNA(自备) X
ASFV 专一性引物一 2 uL
ASFV 专一性引物二 2 uL
补水到 60 uL
三、PCR 反应参数:
过程 温度 时间
预变性 94℃ 5 min
PCR 反应
(35 个循环)
94℃ 1 min
50℃ 1 min
72℃ 1 min
最后延伸 72℃ 10 min
保存条件:保存于-20℃,避免反复冻融。没有反复冻融的情况下,保质期一年。
鲁氏不动杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒操作步骤:
1:样品准备:取1毫升细胞培养上清(贴壁和悬浮细胞都可以,最好已培养48小时以上),在16000g离心5分钟,小心弃去上清,避免丢失沉淀(沉淀量有可能很少,目视看不到)。将沉淀用无菌PBS重悬,在16000g离心5分钟,同样小心弃去上清,如此反复用无菌PBS洗三次。最后将获得的沉淀用100微升超纯水重悬,置于100℃水浴中孵育5分钟。如此制备好的样品可在4℃保存1到2个月。
2:PCR反应的准备:
待各组份融化后先瞬时离心,然后轻弹混匀。按下表在已灭菌的PCR管中配制反应体系,每次实验需加一个阴性和一个阳性对照,测试反应管可以有多个。配制过程中应注意无菌,戴口罩,并注意避免操作产生的气溶胶造成样品间的交叉污染,推荐在有风压的设备如超净台或生物安全柜中进行操作。建议配制完毕后瞬时离心以使液体沉至管底。