Improved Antigen Retrieval Buffer (50X Citrate Sodium Buffer, pH 6.0)

改进型柠檬酸钠抗原修复液（50X）

产品信息

产品描述

柠檬酸钠抗原修复液是一种最常用的抗原修复液，本产品在原有基础上进行优化，更适用于石蜡切片、冰冻切片等样品试用多聚甲醛、甲醛或其他醛类试剂固定后的抗原修复试剂。在相同染色条件下，本产品比普通的抗原修复液获得的染色信号更强，背景更低，能够有效去除因使用多聚甲醛、甲醛等醛类试剂固定后导致蛋白间的交联，并充分暴露样品中的抗原表位，从而改善免疫染色效果，广泛用于石蜡切片和冰冻切片等其他样品。

一般来说，石蜡切片需要进行抗原修复处理，抗原修复的步骤会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，而对于冰冻切片，当其染色效果不佳时，可以尝试进行抗原修复。理论上，无论是冰冻切片还是细胞爬片，只要是用多聚甲醛、甲醛或者其它醛类试剂固定的样品，抗原修复的步骤都可以有效去除蛋白之间的交联，暴露抗原表位，改善免疫染色效果。

运输和保存方法

冰袋（wet ice）运输。

4℃保存，有效期1年。

使用方法

1）将本产品50倍稀释（注：100 mL的本产品稀释之后可以得到5000 mL 1×的抗原修复液）

2）使用前需水浴锅或微波炉等使抗原修复液（1×）预热到95-100℃。

3）石蜡切片：

1.1脱蜡：切片在二甲苯中脱蜡5 min，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5 min，2次。90%乙醇5 min，两次，70%乙醇5 min，一次。蒸馏水5 min，两次。

1.2抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液（1×）中，95-100℃加热约20 min（加热时间可以控制在10-30 min内，最佳加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索），之后冷却至室温（时间大约为20-30 min）。用免疫染色洗涤液（一般为PBS或TBS）洗涤1-2次，每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

冰冻切片：

用免疫染色洗涤液（一般为PBS或TBS）洗涤切片5 min。将切片浸泡在抗原修复液（1×）中，95-100℃加热约20 min（加热时间可以控制在10-30 min内，最佳加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索），之后冷却至室温（时间大约为20-30 min）。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次，每次3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

其他样品抗原修复：参考石蜡切片和冰冻切片进行操作。

注意事项

1）本抗原修复液使用前须用重蒸水或去离子水稀释50倍，配制成1X抗原修复液。按照每个片子大约需要10 mL抗原修复液（1×）计算，一个包装的本产品可以用于500个片子的抗原修复。

2）抗原修复过程需使用耐热染色架进行操作。

3）抗原修复液使用前需预热，如果使用微波炉预热，需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB190809