蛋白从头测序(De Novo Sequencing)无需参考基因组或数据库,直接解析蛋白质一级结构(氨基酸序列)。尽管近年来技术取得了显著进展,但仍然面临诸多挑战,如序列解析的准确性、复杂样本的测序难度、翻译后修饰(PTMs)影响以及计算复杂度等问题。本文将探讨蛋白从头测序的主要挑战,并介绍相应的解
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在蛋白质这类复杂生物大分子中,N端(氨基末端)和C末端(羧基末端)并非只是结构上的“起点与终点”,它们分别承担着识别、定位、调控与降解等核心功能。随着蛋白质组学和生物制药领域的迅速发展,N端和C末端的氨基酸序列分析不仅成为理解蛋白质功能的切入点,也为疾病机制研究和生物药开发提
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蛋白从头测序(De Novo Sequencing)是一种无需依赖基因组或数据库,直接解析蛋白质一级结构的技术,尤其适用于未知蛋白、新型抗体、非模式生物及复杂翻译后修饰(PTMs)研究。相比传统依赖数据库的质谱鉴定方法,从头测序在新蛋白发现和复杂修饰解析中具有独特优势。然而,该技术在长序列拼接、低丰
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Edman测序是一种基于化学反应逐步解析蛋白质N端氨基酸序列的方法,广泛应用于蛋白质一级结构研究。虽然现代质谱技术在蛋白质组学中占据主导地位,但Edman测序仍以其高专一性、直接测定序列的能力,在特定研究需求中保有技术优势。本文将系统阐述Edman测序的基本原理、技术优缺点,为科研人员提供准确、清晰
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N端测序(N-terminal sequencing)用于解析蛋白质或多肽的N端氨基酸序列。在实验过程中,为确保测序准确性和可靠性,以下5大黄金要点至关重要。 1、确保样品纯度:减少杂质干扰 N端测序对样品的纯度要求极高,杂质可能导致测序信号重叠,影响序列解析。样本纯度直接影响标记效率与检测灵敏度
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在生命科学研究与生物制药开发中,蛋白质一级结构的解析(即氨基酸的线性顺序)是理解其功能、验证表达、确认一致性的重要基础。传统的蛋白鉴定方式多数依赖于已知基因或数据库支持,在面对未知蛋白、人工构建体或含有非典型翻译后修饰产物时,常常面临解析受限的问题。 这正是蛋白全长测序(Protein de no
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确定蛋白全长序列(Full-length protein sequence)是蛋白质研究中的基础工作,尤其在新蛋白功能研究、结构分析、抗体制备及重组表达等场景中尤为重要。那么,科研人员究竟应如何获得一个蛋白质的完整氨基酸序列呢?本文将从技术角度系统梳理,并结合当前主流方法与最新进展,提供实用思路。
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肽鉴定是蛋白质组学研究中的一个核心步骤,指的是通过质谱技术或其他分析手段来识别并确认样品中肽段的氨基酸序列。肽是由氨基酸通过肽键连接而成的短链分子,是蛋白质的基本组成单位。在蛋白质组学中,它主要用于解析复杂生物样品中的蛋白质成分,通过识别肽段的序列,研究人员能够推断出样品中的蛋白质种类及其相对丰度。
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体外蛋白质相互作用分析是研究蛋白质之间如何相互识别和结合的关键技术。这种分析提供了理解生物分子网络的基础,有助于揭示细胞内信号传导、基因调控和代谢途径等复杂过程。通过体外蛋白质相互作用分析,科学家们可以重建细胞内的功能网络图谱,从而更好地理解疾病机制,发现新的治疗靶点。体外蛋白质相互作用分析在药物研
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平行反应监测(PRM)是基于高分辨质谱技术的相对和绝对定量蛋白质分析方法,其具体应用场景涵盖了多种领域。在蛋白质组学研究中,PRM被用于精确定量目标蛋白质,为理解复杂生物过程提供工具。药物研发中,平行反应监测(PRM)帮助研究人员监测药物在体内的代谢情况,从而优化药物设计。在环境监测方面,PRM可以
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